RESUMO
We used four microsatellite loci (Fca08, Fca45, Fca77 and Fca96) from the domestic cat, Felis catus, to investigate genetic variability in specimens of Herpailurus yagouaroundi (jaguarundi, otter cat, eyra), Puma concolor (cougar, mountain lion, puma) and Panthera onca (jaguar) held in various Brazilian zoos. Samples of DNA from the cats were PCR amplified and then sequenced before being analyzed using the CERVUS program. Our results show a mean polymorphic information content (PIC) of 0.83 for H. yagouaroundi, 0.66 for P. concolor and 0.69 for P. onca and a mean of 10.3 alleles for the Fca08 locus, 5.3 for Fca 45, 9 for Fca 77 and 14 for Fca 96. These results indicate a relatively high level of genetic diversity for the specimens studied.
Assuntos
Animais , Felidae/genética , Variação Genética , Gatos/genética , Genética Populacional , Repetições de Microssatélites , Reação em Cadeia da PolimeraseRESUMO
O aperfeiçoamento das técnicas que objetivam a exploraçäo do potencial reprodutivo das fêmeas requer a compreensäo mais ampla dos mecanismos de controle de desenvolvimento folicular. Uma alternativa de estudo nesta esfera, é a quantificaçäo da expressäo relativa de genes envolvidos nos processos de recrutamento, seleçäo e desenvolvimento folicular, pelo emprego da técnica de transcriçäo - reversa associado a reaçäo em cadeia pela polimerase (RT - PCR). O presente trabalho objetivou quantificar a expressäo relativa dos genes insulin-like growth factor I (IGF-I) e do receptor do hormônio folículo estimulante (FSHR), tendo como controle interno o gene da gliceraldeído 3-fosfato desidrogenase (GAPDH). Foram utilizados ovários bovinos de animais de matadouro em diferentes fases do ciclo estral. O RNA total dos folículos e tecido ovarianos foi purificado por TRIZOL. As reaçöes de RT-PCR foram realizadas com o "kit" SuperScriptTM First-Strand. Os produtos de PCR foram analisados em gel de agarose e as bandas submetidas à análise densitométrica. Todos os genes foram amplificados observando-se a curva exponencial de amplificaçäo, a validaçäo do método foi realizada através de análise de regressäo, sendo estabelecido o coeficiente de amplificaçäo (E). A expressäo relativa de mRNA para cada gene de interesse foi calculada pela fórmula estabelecida por Prelle et al.12. Em todos os tecidos analisados, todos os genes foram expressos, sobressaltando-se diferenças nos diferentes ciclos estudados. Com relaçäo os dados referentes ao coeficiente de amplificaçäo (E), observou-se tanto para gene controle (GAPDH), como para o gene IGF-I concordância nos valores encontrados para as diferentes classes analisadas. Quanto ao gene IGF-I, a interpretaçäo dos achados para a expressäo relativa de mRNA pode está relacionada ao caráter constitutivo dessa proteína ou devido os transcritos näo serem dependentes dos níveis de FSH. Observou-se diferenças na expressäo relativa de mRNA de FSHR entre as classes de tecidos analisados, o que pode ser explicado pela variaçäo do número de receptores nas células da granulosa nas diferentes fases do ciclo estral. Pode-se perceber a partir desse estudo que a técnica de RT-PCR semi quantitativo é de grande importância biotecnológica, possibilitando auxílio na compreensäo da dinâmica folicular. Entretanto esses estudos devem ser ampliados com outros genes para melhor compreensäo das etapas fisiológicas envolvidas na foliculogênese